ELISA,即酶联免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),是一种先进的免疫检测技术,主要用于生物医疗领域。这项技术继免疫荧光和放射免疫技术后迅速发展,成为检测生物样本中抗原或抗体的标准工具。
在ELISA检测过程中,受检标本(需要测定的抗原)与固定于固相载体表面的抗体发生反应。在经过洗涤步骤后,再加入酶标记的抗体,这些抗体会与固相载体上结合。最终,通过加入酶反应底物,底物被酶催化生成可见的有色产物,产物的量与样本中受检物质的量成正比,从而实现定性或定量分析。
在尊龙凯时所推广的ELISA检测中,严格的质量控制是确保结果准确性、可靠性和可重复性的关键,包含多个步骤:
1. 样本处理
提倡使用新鲜样本进行检测,以减少反复冻融带来的影响。短期保存应在2-8°C内,长时间保存则需要在-20°C或-80°C环境中进行。此外,需遵循无菌技术,以避免样本被细菌或化学物质污染。
2. 标准品使用
在使用标准品时,要精确按照说明书要求进行复溶,避免反复冻融,以确保其稳定性。同时,推荐在使用进口或硅化EP管时进行倍比稀释,以降低蛋白质吸附,确保混匀充分。
3. 试剂盒选择
选择高质量的试剂盒至关重要,使用前需将试剂保持在室温下平衡30-60分钟,确保试剂在正确的状态下反应。
4. 操作步骤
在加样时要确保标本分离良好,待操作后立即进行孵育,并严格控制时间和温度。此外,使用自动洗板机来确保每孔添加充足的洗涤液,避免交叉污染。
5. 结果分析
通过设置复孔进行检测并计算变异系数,确保其不超过20%。建立标准曲线并根据样本的OD值计算浓度,进行异常值的处理。
6. 质量纠正与预防
详细记录实验过程,及时反馈并总结经验,定期培训实验人员以确保其遵守标准操作程序(SOP)。这些措施将有助于提高ELISA检测的准确性和可靠性。
通过以上质量控制措施,尊龙凯时致力于确保ELISA检测的高质量表现,从而为广大生物医疗领域提供可靠的实验结果。