人类骨形态发生蛋白4(BMP-4)是胚胎发育的重要调控因子,促进胚胎干细胞和诱导性多能干细胞的分化。BMP-4还在间充质细胞向脂肪细胞转化、上皮癌细胞的上皮-间质转化(EMT)、以及神经元和神经胶质细胞的发育中发挥着关键作用。然而,其蛋白质生产面临诸多挑战,包括纯度和活性等方面。因此,拥有高纯度、高活性、原料明确且批间差异小的BMP-4将为科研和产业化提供良好的竞争优势。
QkineBMP-4(Qk038)为一种高纯度、无动物来源且不含载体蛋白的24kDa二硫键连接的生物活性二聚体,由人类BMP-4蛋白的成熟结构域组成。使用BMP4反应性萤火虫荧光素酶报告基因检测,测定转染HEK293T细胞中的BMP-4活性。通过不同梯度稀释BMP-4,分别对细胞进行三次处理,每次持续6小时,测量萤火虫荧光素酶的活性,并将其与对照海肾荧火虫荧光素酶活性进行标准化。结果显示,EC50值为302pM(0.72ng/ml),数据来源于Qk038批号#104294。
与其他供应商提供的细菌和哺乳动物表达的BMP-4相比,QkineBMP-4的生物活性更高。定量荧光素酶分析中,使用QkineBMP-4(Qk038,绿色)与其他供应商(供应商A,蓝色;供应商B,黑色)的BMP-4进行比较。同样对细胞进行三次处理,每次6小时,测量光学活性并进行标准化。
在非还原性(NR)条件下,BMP-4蛋白(Qk038)以24kDa的单一条带迁移,而在还原性(R)条件下则以13kDa的单体形式迁移,二聚体蛋白的纯度显著高。纯化的重组蛋白(3μg)在还原性(+β-巯基乙醇,R)和非还原性(NR)条件下使用15% w/v SDS-PAGE进行分离,并用考马斯亮蓝R250染色,数据来自Qk038批号#104294。
骨形态发生蛋白4(BMP-4)属于TGF-β生长因子超家族,是胚胎发生的关键调节因子,参与原肠胚形成、胚胎背腹轴的建立及肢体发育的调控。BMP家族广泛参与骨骼和软骨的发育和维持,并在成人中对骨骼和软骨代谢、神经发生及造血干细胞归巢有重要影响。BMP-4蛋白通过两种丝氨酸-苏氨酸激酶受体;骨形态发生蛋白受体(BMPR)1和BMPR2,启动Smad和MAP激酶信号通路,从而影响靶基因的转录。
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